BMC UD9

En una reacción de PCR, ¿cómo conseguimos evitar la inactivación de la polimerasa de ADN?   

• 1. Utilizando polimerasas del ADN que sean termoestables

• 1. Diseñando cebadores específicos para el fragmento que se quiere amplificar

• 1. Programando el termociclador con menos ciclos

• 1. Pipeteando un único desoxinucleótido (dNTP)

No es un componente de la reacción de PCR:

• Cebadores

• Formol

• ADN polimerasa termoestable

• ADN molde

Actúa como cofactor de la ADN polimerasa en la PCR

• Cloruro de magnesio

• Desoxirribonucleótidos

• Cebadores

• DMSO

Respecto a la extensión de los cebadores...

• La temperatura óptima es de 72^oC

• La temperatura óptima es de 50-65^oC

• El tiempo no depende de la longitud de los fragmentos

• La temperatura es de 94-95^oC

Answer explanation

 

1. ¿Qué ocurre en la fase de hibridación de una PCR?

   3.  

• 1. La doble hélice de ADN se separa en dos hebras.

• 1. La ADN polimerasa sintetiza una nueva cadena copiando la hebra molde.

• 1. Los cebadores se unen a los extremos del fragmento de interés.

• 1. Las dos hebras de ADN se renaturalizan.

Hacemos una PCR de 40 ciclos a una muestra que contiene 5 copias de ADN, ¿cuántos amplicones obtendremos?

• 5 * 2⁴⁰

• 5 * 40²

• 5 * 40

• 5 * 2⁵

1. Queremos realizar una PCR para detectar el virus del papiloma humano en el ADN de 5 muestras provenientes de 10 pacientes. ¿Para cuántos tubos realizaríamos los cálculos de cada componente de reacción?

• 10

• 11

• 12

• 13

1. Si al analizar los resultados de una PCR convencional SI aparece una banda en el control negativo indica...

• 1. Posible contaminación de los reactivos utilizados. 

• 1. Posible contaminación de las pipetas utilizadas.

• Que no podemos descartar falsos positivos

• Todas son correctas

Tenemos dos muestras de ADN a la que les hacemos una PCR a tiempo real (en las mismas condiciones). La muestra A tiene un Ct de 35 y la muestra B un Ct de 20 ¿Cuál de las dos muestras tiene más concentración de ADN?

• Muestra A

• Muestra B

1. ¿En qué modalidad de PCR convencional se realizan dos reacciones de PCR en dos rondas de amplificación?

• PCR con inicio en caliente

• PCR de grandes fragmentos

• PCR anidada

• PCR múltiple