AYUDANTÍA CITOESQUELETO BIO274E

Respecto a los microfilamentos, es INCORRECTO afirmar que:

• La concentración crítica del extremo + es mayor que la concentración crítica del extremo -.

• Durante el treadmilling, la concentración de G-actina-ATP está en un valor entre las concentraciones críticas de ambos extremos.

• Mayoritariamente, la F-actina en células in vivo se encuentra en el estado estacionario.

• El efecto rotatorio en la polimerización de actina está estrechamente relacionado con la hidrólisis de ATP en la F-actina.

La polimerización de F-actina:

• Disminuye su velocidad al aumentar la razón profilina/G-actina.

• No cambia su velocidad al aumentar simultánea y proporcionalmente la concentración de timosina B4 y profilina.

• Tiene como paso limitante la nucleación.

• Se detiene al alcanzar el estado estacionario, lo cual explica la longitud constante del filamento.

¿Qué tipos de redes de filamentos de actina existen? ¿A qué tipo de estímulos responde su formación, y cuáles proteínas GTPasas la inducen?

Answer explanation

Haz contráctil (fibras de estrés): En respuesta a señales de repulsión. Inducida por Rho.

Fibras paralelas (filopodios): En respuesta a señales de atracción. Inducida por Cdc42.

Fibras ramificadas (lamelopodios): En respuesta a señales de atracción. Inducida por Rac.

Respecto a las proteínas de unión a actina, es correcto afirmar que:

• Las proteínas de crosslinking permiten formar filamentos ramificados.

• Formina se mantiene unida al leading edge (extremo +) durante la polimerización de actina en protrusiones, anclándolo a la membrana plasmática.

• Todas tienen mayor afinidad por actina-ADP que por actina-ATP.

• Miosina es importante en la extensión de lamelopodios.

Una proteína X se mantiene distribuida equitativamente dentro de la célula, debido a un transporte equilibrado. Se realiza una mutación que causa pérdida de función en el adaptador que permite su unión a la principal kinesina con la cual interactúa la proteína X. En una inmunofluorescencia, ¿Cómo esperarías que fuera la localización de la proteína X?

Answer explanation

Mayor intensidad de fluorescencia de la proteína hacía el interior, menor intensidad de fluorescencia en la periferia. Se interrumpe el transporte anterógrado, el transporte retrógrado sigue funcionando.

¿Con que técnica estudiarías el  transporte de una proteína a lo largo del axón neuronal? ¿Qué proteínas motoras deberían estar involucradas en un una u otro movimiento?

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La siguiente figura muestra un estudio de los mecanismos de avance del cono de crecimiento. En el panel A se muestran fotos del avance del cono de crecimiento axonal a los 60 minutos inducido por NGF (factor de crecimiento nervioso) en ausencia o presencia de un shRNA para de Arp2/3, llamado CK666. En el panel B el grafico muestra la cuantificación del avance del cono de crecimiento inducido por NGF en ausencia (barra blanca) o presencia (barra gris) de CK666. En el panel C se muestran los filamentos de actina marcados con faloidina de neuronas tratadas con NGF en ausencia o presencia de CK666.

¿Qué hace el NGF sobre el avance del cono de crecimiento?. ¿Como la clasificarías respecto a esta función?

¿Como actúan los shRNA para inhibir la función de una proteína?